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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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琥珀蚕内参基因的克隆及表达稳定性检测

【期刊年份】2018年第03期
【作者姓名】陈安利  钟健  刘增虎  李琼艳  廖鹏飞  杨伟克  董占鹏
【作者单位】云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

摘要  琥珀蚕(Antheraea assama)是一种重要的野蚕种质资源。为了开展琥珀蚕功能基因的研究,选择合适的内参基因非常必要。通过cDNA末端快速扩增技术获得琥珀蚕功能基因研究的3个常用内参基因β-actinGAPDH和18S rRNA的cDNA全长序列,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析3个基因在蚕体不同组织中的转录水平,并利用标准化分析软件geNorm和NormFinder分析其表达的稳定性。结果显示,3个内参基因的表达稳定性依次为β-actinGAPDH、18S rRNA。就组织表达而言,β-actin在幼虫的中肠、脂肪体、马氏管、气孔、丝腺和卵巢以及蛹的输卵管中表达相对稳定;就发育时期的表达而言,β-actin在蛾期的表达也相对稳定。此外,GAPDH在幼虫头部、表皮和血液中的表达相对稳定;18S rRNA在幼虫精巢中的表达相对稳定。对琥珀蚕功能基因表达进行qRT-PCR所需内参基因数量的分析表明,选用2个内参基因即可满足试验需求。

关键词  琥珀蚕; 内参基因; 全长cDNA序列; 表达稳定性