摘要  针对目前家蚕基因组编辑平台在基因组特定位点的靶点选择、多靶点同时编辑等方面的技术瓶颈，利用家蚕卵巢培养细胞系（BmN)验证含有双核酶结构的RGR（Ribozyme-gRNA-Ribozyme）在CRISPR/Cas9基因组编辑系统中的应用效果，用以拓展现有CRISPR/Cas9系统的靶点范围。研究结果显示，采用Cas9系统和Cpf1系统，RGR结构在BmN细胞中具有良好的定点编辑效果，可成功实现对内源、外源靶基因序列的剪切，且对内外源基因具有高效编辑作用，表明RGR结构可应用于家蚕CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1基因组编辑系统。利用RGR结构的自剪切功能不仅可以拓展家蚕基因组靶基因的范围，还为进一步实现多靶点编辑打下了基础。