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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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家蚕翅原基发育关联基因 BmHMGS的鉴定与表达特征分析

【期刊年份】2018年第02期
【作者姓名】蒋诗梦1,2  钟杨生1  林碧敏1  陈芳艳1  严会超1  林健荣1
【作者单位】1华南农业大学动物科学学院;2湖南省蚕桑科学研究所

摘要  家蚕幼虫的翅原基最终发育为成虫的翅,翅原基发育与家蚕的变态发育紧密关联。为了研究激素作用下家蚕翅原基发育的分子调控机制,以经过蜕皮激素20E体外诱导培养和未经诱导培养的家蚕5龄幼虫翅原基为材料分别提取总蛋白质,利用Shotgun质谱分析在20E诱导组的翅原基中获得132种差异蛋白,在未经20E诱导组的翅原基中获得76种差异蛋白。进一步通过生物信息学技术及GO分类法在20E诱导组的翅原基的差异蛋白中,筛选到1个具有生物调节作用的酶类蛋白基因BmHMGS作为翅原基发育相关的候选基因,设计引物并以上蔟1 d的蚕体翅原基总RNA反转录得到的cDNA为模板,克隆了该基因。通过qRT-PCR检测到BmHMGS基因在幼虫5龄1 d、上蔟3 d、蛹期1 d蚕体内的表达量较高,其中在上蔟3 d的表达量达到峰值。构建重组载体进行BmHMGS的原核表达并制备抗体后,采用Western blot技术在5龄1~7 d和上蔟1~3 d的蚕体翅原基、脂肪体中及上蔟1~3 d的生殖腺中都可以检测到BmHMGS的表达,并且在翅原基中的表达没有发育时期特异性。研究结果表明,从20E诱导组的家蚕翅原基中鉴定的BmHMGS与翅原基发育相关,其表达在5龄至上蔟阶段没有时期和组织的特异性,推测BmHMGS是一个具有多种生物学功能的基因。

关键词  家蚕翅原基; 体外培养; 蜕皮激素; Shotgun质谱; BmHMGS基因; 表达特征