应用高效液相色谱技术检测家蚕血液中吡虫啉含量的方法
摘要 吡虫啉是应用非常广泛的烟碱类高效杀虫剂,对非靶标昆虫家蚕具有毒性。准确测定家蚕血液中的吡虫啉含量,有利于深入研究该杀虫剂对家蚕产生毒性的生理生化机制,为此建立家蚕血液中吡虫啉含量的高效液相色谱(HPLC)检测分析方法。以添毒处理后的家蚕5龄第2天幼虫血液供试,首先采用甲酸-二氯甲烷两步沉淀法去除幼虫血清中的脂质及蛋白质等杂质,然后采用二氯甲烷振荡法提取幼虫血液中的吡虫啉,最后优化液相色谱测定血液样品中吡虫啉含量的条件为:使用Kromasil 100-5C18色谱柱,检测波长254 nm,用甲醇与1%乙酸的混合液(体积比45∶55)以0.8 mL/min恒速洗脱。应用上述方法测定家蚕血液中吡虫啉的含量,其标准曲线线性相关系数为0.999 6,回收率为92.1%~96.6%,相对标准偏差(RSD)≤2.2%,方法检测限为0.5 μg/mL;检测吡虫啉在家蚕5龄第2天幼虫体内的半衰期为1 h。该方法用于检测分析家蚕血液中的吡虫啉含量,具有简便快捷、回收率高、重现性好、结果准确的优点。