杆状病毒表达系统融合表达猪圆环病毒2型Cap蛋白与口蹄疫病毒VP1蛋白及免疫原性评估
【期刊年份】2018年第02期
【作者姓名】刘小康1 江乾森1 杨意1 陈健1 何玉龙1 杨芳2 唐少君1,2 舒建洪1,2
【作者单位】1浙江理工大学生命科学学院;2杭州洪桥中科基因技术有限公司
摘要 猪圆环病毒2型(porcine
circovirus type 2,PCV2)Cap蛋白是病毒的主要结构蛋白,能诱导宿主产生特异性免疫应答。口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能刺激机体产生中和抗体。利用杆状病毒表面展示系统,将这2种病毒蛋白与猪CD40配体(CD40 ligand,CD40L)进行融合表达并展示在杆状病毒表面,构建了rvAc-Cap、rvAc-VP1和rvAc-Cap-VP1 3种重组杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blotting检测3种重组杆状病毒感染的Sf9细胞总蛋白,证明3种融合蛋白成功表达。纯化的重组杆状病毒颗粒以1×108 pfu/只的剂量免疫接种BALB/c小鼠,通过间接ELISA检测血清中Cap和VP1的抗体浓度,证明表面展示有Cap和VP1的重组杆状病毒能激发小鼠产生较高水平的抗体,与PCV2和FMDV商品化疫苗免疫组的抗体浓度差异不显著(P>0.05),表明该重组杆状病毒具有较好的免疫原性。
关键词 猪圆环病毒2型Cap蛋白; 口蹄疫病毒VP1蛋白; 杆状病毒; 表面展示; 免疫原性