摘要  己糖激酶（hexokinase，HXK）是糖酵解途径的限速酶，在能量代谢中充当极其重要的角色。家蚕微孢子虫（Nosema bombycis）具有完整的糖酵解途径，其基因组中有2个序列相似度较高的己糖激酶编码基因拷贝（NBO_1320g0001，NBO_27g0008）。根据其中的一个基因拷贝(NBO_27g0008)序列设计特异性引物，以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板成功克隆了该基因，命名为NbHXK-1。该基因大小为894 bp，包含完整的ORF，编码297个氨基酸，预测蛋白质的分子质量为34.241 kD，等电点（pI）为5.26，蛋白质的氨基酸序列有31个磷酸化位点和4个潜在的N-糖基化位点，无跨膜结构域，有信号肽，二级结构主要由α螺旋（54.55%）、延伸片段（17.80%）和无规则卷曲（27.61%）组成。系统进化分析显示NbHXK-1与东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）己糖激酶（NcHXK）氨基酸序列的亲缘关系较近。将NbHXK-1基因插入原核表达载体pET-28a（+）并转化BL21（DE3）感受态细胞，用IPTG诱导表达后经蛋白质串联质谱鉴定和Western blot分析显示，获得了与预期大小一致的约35 kD的重组NbHXK-1蛋白，为进一步阐明NbHXK-1的生物学功能奠定了基础。