摘要  对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA，生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因BmSer-1有调控作用。设计特异性茎环引物，利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺（包括前、中、后部丝腺）、头部、脂肪体、表皮、中肠、马氏管、精巢/卵巢、血淋巴细胞和气管等12个器官组织中Bmo-miR-0047的表达情况。结果显示，中部丝腺中Bmo-miR-0047的相对表达量明显高于其他组织，说明在家蚕5龄幼虫期Bmo-miR-0047对BmSer-1基因的表达调控存在时空特异性。为了进一步分析Bmo-miR-0047对BmSer-1基因表达的调控作用，构建重组表达载体pcDNA3.0(ie1egfp-pri-miR-0047-SV40)和pGL3(A3-luc-BmSer-1 3′UTR-SV40)，并以海肾荧光素酶报告质粒pRL-CMV为内参，利用家蚕卵巢培养细胞BmN进行共转染。转染后检测发现实验组BmN细胞中的荧光素酶活性与对照组相比显著减弱，表明Bmo-miR-0047在体外培养细胞中对BmSer-1基因的表达具有负调控作用。

关键词  家蚕； 微小RNA； Bmo-miR-0047； 丝胶蛋白基因Ser-1； 转录后调控