摘要  口服胰岛素（INS）治疗糖尿病存在因胃肠道的蛋白酶而发生药物降解的问题。从家蚕蛹中分离了BmKazal、BmCP82种蛋白酶抑制剂，设计其编码基因引物序列克隆2个目的基因，构建重组表达载体pET28a-BmKazal和pET32a-BmCP8在大肠埃希菌（ Escherichia coli）中表达并纯化了重组BmKazal和BmCP8蛋白。将这2种蛋白酶抑制剂与INS混匀制成INS口服悬液给小鼠灌胃，研究其对INS口服吸收的影响。试验结果表明：按1.5 IU/kg剂量皮下注射INS的对照组小鼠，血药达峰浓度C_max为（7.56±1.40）mIU/L，达峰时间T_max为1 h；口服0.5 μg/μL BmCP8+15 IU/kg INS组、0.5 μg/μL BmKazal+15 IU/kg INS组、0.5 μg/μL BmCP8+0.5 μg/μL BmKazal+15 IU/kg INS组小鼠的血药达峰浓度C_max分别为（6.07±0.51）、（7.12±0.89）、（9.20±2.00）mIU/L，达峰时间T_max均为3 h；而按15 IU/kg 剂量单纯口服INS对照组小鼠的血药浓度一直维持在4.32 mIU/L左右。以上结果说明BmCP8、BmKazal能够协同INS经小鼠胃肠道口服吸收入血液，而且二者联合使用效果更好，使小鼠体内对INS的口服生物利用度由1.51%提高至4.17%，有促进小鼠对胰岛素口服吸收的作用。

关键词  胰岛素； 重组家蚕蛋白酶抑制剂； 口服吸收； 小鼠