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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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柞蚕核型多角体病毒实时荧光LAMP检测方法的初步建立

【期刊年份】2017年第06期
【作者姓名】张洋 薛强 金英 李凤芹 闫伟
【作者单位】1吉林省蚕业科学研究院,吉林 吉林132112;2吉林省农业科学院,长春130124

摘要  柞蚕脓病是柞蚕生产上的主要病害之一,病原为柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)。建立快速而准确检测蚕体样品中ApNPV的技术,将有助于对病害的早期诊断及流行病学调查和实施有效的防控措施。以柞蚕核型多角体病毒ORF142基因为靶基因,设计2组特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,利用实时荧光PCR技术进行检测分析。结果表明,设计与合成的2组引物均能对柞蚕核型多角体病毒基因组扩增出特异性产物,其中引物组263 开始孵育60 min,反应起始扩增时间为12 min,当反应时间达到40 min时,扩增曲线的最大相对荧光强度(RFU)值达6 000,相对于引物组1具有更好的及时性,可缩短一半反应起始时间。初步建立的ApNPV实时荧光LAMP检测方法相对于传统PCR方法,检测效率提高4倍左右。

关键词  柞蚕核型多角体病毒; 环介导等温扩增技术; 引物; 反应条件; 早期诊断