摘要  ω3-脂肪酸脱氢酶是生物体内催化多不饱和脂肪酸合成的关键酶之一，其表达受生物胁迫和非生物胁迫因素的影响。从家蚕蛹中克隆了类ω3-脂肪酸脱氢酶基因（BmFAD3-like），该基因具有一个长度为1 083 bp的开放阅读框，编码由360个氨基酸残基组成的分子质量为41.5 kD 的蛋白质。将该基因克隆到pYES2.0载体，构建重组表达载体pYBmFAD3-like及重组酿酒酵母工程菌株YBmFAD3-like后进行诱导表达，收集菌体提取脂肪酸，经气相色谱检测表明异源表达的重组BmFAD3-like能够将诱导表达体系中加入的外源底物亚油酸（LA）转化为α-亚麻酸（ALA）。半定量RT-PCR检测BmFAD3-like基因mRNA几乎在家蚕5龄第3天幼虫的所有组织中都有转录，在5龄幼虫期、蛹期和蛾期的转录水平较高，并且其转录水平受低温（0 ℃）和真菌（球孢白僵菌Beauveria bassiana）侵染（6～36 h）诱导显著上调。对家蚕蛹体注射siRNA沉默目的基因 12～72 h后，BmFAD3-like mRNA转录水平显著下调。研究结果表明，BmFAD3-like的表达产物能催化LA在ω3位脱氢生成ALA，并且该基因在蚕体受到低温诱导和真菌侵染等胁迫时显著上调表达，外源siRNA能够介导该基因的沉默，显著下调其转录水平。

关键词  家蚕； ω3-脂肪酸脱氢酶； 基因克隆； 酿酒酵母表达系统； 表达谱； 多不饱和脂肪酸合成； 诱导表达