摘要  从家蚕蛹cDNA文库中筛选到一个403 bp的未知功能基因，将其命名为BmMP54（GenBank登录号：DY231399.1）。该基因序列包含312 bp的开放阅读框，编码由103个氨基酸残基组成的蛋白质，生物信息学预测其含有2个跨膜区域，等电点及分子质量分别为9.90和10.463 kD。将BmMP54与家蚕核型多角体病毒（BmNPV）的多角体蛋白基因(Polh)融合后分别连接到原核表达载体pGEX-4T-1和家蚕杆状病毒表达系统转移载体pFastBacTMHTB中构建重组质粒，并分别在大肠埃希菌BL21(DE3)和家蚕卵巢培养细胞（BmN）中表达。原核表达的融合蛋白通过调节pH值、阴离子交换层析等纯化获得了65 kD的重组融合蛋白Polh-BmMP54，通过Western blotting可在重组杆状病毒感染的BmN细胞中检测到42 kD左右的BmMP54重组蛋白，表明已按设计要求高效表达并纯化获得目的蛋白质。实时荧光定量PCR分析显示BmMP54在家蚕5龄幼虫的气门和脂肪体组织中表达量最高，在表皮和头部的表达量最低。上述研究结果有利于后续探讨BmMP54在家蚕生长发育过程中的生物学功能。

关键词  家蚕MP54基因； 跨膜蛋白； 家蚕核型多角体病毒多角体蛋白基因； 融合表达； 实时荧光定量PCR； 表达谱