摘要  桑树皱叶病毒（mulberry crinkle leaf virus,MCLV）是近年从感病桑树中分离鉴定的一种新的桑树病毒，该病毒属于双生病毒科。由于MCLV外壳蛋白基因(cp)序列中含有较多大肠埃希菌（Escherichia mori）BL21（DE3）的稀有密码子而限制了其在大肠埃希菌中的表达。通过人工合成DNA的方法对MCLV cp基因序列进行优化，将其中40个大肠埃希菌稀有密码子变换成同义偏爱密码子，构建优化后的MCLV cp基因的原核表达载体pGEX4T-MCLV CP并转化大肠埃希菌BL21（DE3）菌株，经0.1 mmol/L IPTG诱导及SDS-PAGE电泳鉴定，实现了融合蛋白GST-MCLV CP在大肠埃希菌BL21（DE3）中高效表达。通过SDS-PAGE纯化后切胶回收原核表达的融合蛋白GST-MCLV CP，以其为抗原免疫新西兰大白兔制备MCLV CP的多克隆抗体，经间接ELISA法测定该抗血清的效价为1∶4 096，Western blot检测其能与MCLV发生特异性反应。用制备的抗血清对MCLV感染阳性的桑叶样品进行间接ELISA检测，其检出率仅为25%，但将桑叶样品的粗汁液煮沸处理后能显著提高MCLV的检出率，检出率达83.3%。

关键词  桑树皱叶病毒； 外壳蛋白基因； 稀有密码子； 原核表达； 抗血清