家蚕bmo-miR-217对核型多角体病毒(BmNPV)lef-1基因表达的调控作用
摘要 昆虫的单链小分子RNA(microRNAs)不仅通过与自身的靶基因互补进行转录后水平调控,从而参与重要的生命过程,并且还可以与病原体靶基因相互作用,在免疫防御方面发挥重要功能。给家蚕5龄眠起幼虫接种家蚕核型多角体病毒(BmNPV)后72 h,收集蚕体血淋巴提取总RNA用于高通量测序,经克隆验证获得一条由BmNPV诱导上调表达的家蚕miRNA(bmo-miR-217),用生物信息学方法预测到bmo-miR-217对应的一个病毒靶基因为lef1。构建bmo-miR-217及BmNPV lef-1 3′-UTR的表达载体,并共转染家蚕卵巢培养细胞BmN,于48 h后通过检测细胞的双荧光素酶相对活性,显示出bmo-miR-217可显著下调BmNPV lef-1基因的表达(P<0.05)。已知lef-1是BmNPV侵染复制的必需基因之一,因此抑制其表达是家蚕先天免疫的一种有效策略。
关键词 家蚕; 微小RNA; bmo-miR-217; 家蚕核型多角体病毒; lef-1基因