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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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应用原生质体融合技术构建纤维素发酵产油脂菌株的试验

【期刊年份】2017年第02期
【作者姓名】张淑君 李伟庆 牟志美 王彦文 高绘菊
【作者单位】山东农业大学林学院

摘要  原生质体融合(protoplast fusion)技术是将遗传性状不同的亲本原生质体融合杂交的基因重组技术。从健康桑树根系中分离到一株产油脂内生真菌MOD-1,采用酶解方法制备内生真菌MOD-1和产纤维素酶菌株绿色木霉TP4T44及长柄木霉TL的原生质体,获得4个菌株的原生质体产量分别为7.02×106/mL4.43×106/mL6.35×106/mL4.35×106/mL,再生率分别为4.90%3.26%4.51%4.12%。优化亲本原生质体灭活条件为:MOD-1菌株经紫外线照射10 min或加热15 minTP4菌株经紫外线照射25 min或加热20 minT44菌株经紫外线照射25 min或加热25 minTL菌株经紫外线照射30 min或加热25 min。在上述条件下各亲本原生质体的灭活率均达到100%。将灭活的MOD-1菌株原生质体分别与不同方式灭活的TP4T44TL菌株原生质体融合,经初筛和复筛获得了一株兼具MOD-1TP4双亲优良性状的融合菌株MP-1,其油脂产量、油脂含量(质量分数)分别为0.082 4 g/L14.46%,显著高于亲本菌株MOD-1。融合菌株MP-1传代培养10代后,油脂产量与油脂含量的遗传稳定性分别达到92.84%95.00%

关键词  产油脂菌株; 桑树内生真菌; 菜豆壳球孢菌MOD-1 木霉; 原生质体融合; 菌株改良