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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
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  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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表面展示猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1的重组杆状病毒及其免疫效果研究

【期刊年份】2016年第06期
【作者姓名】史翠萍 严婷婷 崔康乐 陈琴 舒建洪 陈健
【作者单位】浙江理工大学生命科学学院;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

摘要  猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)纤突蛋白S1能够介导宿主抵御PEDV感染的中和抗体的产生,是PEDV基因工程疫苗研究的重要靶抗原。将PEDVS1基因克隆至杆状病毒基因组中,构建包含PEDV S1基因的重组杆状病毒,使S1蛋白表面展示表达。以该重组病毒作为活载体疫苗皮下接种BALB/c小鼠,验证S1蛋白在重组杆状病毒中的表达及其免疫原性。Western blotting分析被重组杆状病毒感染的Sf9细胞中,PEDV S1蛋白能有效表达且呈现大小分别约120 kD150 kD2条带,其中前者至少比预期大30 kD左右,推测重组S1蛋白在Sf9细胞中被高度糖基化修饰。重组杆状病毒的胶体金免疫电子显微镜观测结果显示S1蛋白展示于杆状病毒表面;间接ELISA试验结果证明重组杆状病毒可以诱导产生PEDV特异性抗体,抗体效价达到15 000。血清中和试验及淋巴细胞增殖试验结果证明,该重组杆状病毒能够激发有效的体液免疫及细胞免疫反应,S1蛋白在重组杆状病毒表面展示表达并具有免疫原性。

关键词  猪流行性腹泻病毒; 纤突蛋白S1 杆状病毒表面展示系统; 免疫原性