桑树花青素还原酶基因MaANR的克隆和表达分析
摘要 花青素还原酶(ANR)是原花青素单体生物合成过程中的关键酶之一,对花青素在植物组织中的积累有重要调控作用。通过检索川桑(Morus notabilis)基因组数据库鉴定获得了ANR候选基因序列,并以人工四倍体果桑品种嘉陵30号的桑椹cDNA为模板克隆了ANR基因(MaANR),其CDS序列长1 014 bp,编码337个氨基酸残基。聚类分析结果表明MaANR与草莓、西洋梨的花青素还原酶FaANR和PcANR的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR检测MaANR在桑椹中的表达量最高,在桑树其他部位和组织中的表达量极低,在茎中几乎检测不到表达;MaANR在生长发育早期的桑椹中表达量较低,在快速生长过程的桑椹中高量表达,而在花青素大量合成的桑椹成熟时期表达量极低。初步推测MaANR可能是桑椹中花青素积累的重要负调控因子。
关键词 桑树; 花青素还原酶; 基因克隆; 表达模式; 桑椹; 发育时期