摘要  家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV）基因组中的orf90基因（Bm90）是一个未知功能的保守基因。利用λRed重组系统和Bac-to-Bac系统构建野生型病毒WtBacmid-polh-egfp、Bm90基因缺失型病毒Bm90ko-polh-egfp-Bacmid及Bm90基因补回型病毒Bm90re-polh-egfp-Bacmid，并制备Bm90蛋白的多克隆抗体，研究Bm90基因在病毒感染周期中的表达以及对病毒增殖和组装的影响。将3种重组病毒分别转染BmN细胞，Western blot检测显示Bm90蛋白在病毒转染BmN细胞后72 h有表达；但用荧光显微镜观察Bm90基因缺失型病毒转染的BmN细胞中没有出现绿色荧光，且检测其病毒滴度为0；用透射电子显微镜观察在Bm90基因缺失型病毒转染的BmN细胞中没有子代病毒粒子出现。研究结果表明，Bm90基因缺失会抑制子代病毒粒子的组装和产生，使病毒失去侵染性，Bm90基因是病毒增殖及组装的必需基因。

关键词  家蚕核型多角体病毒； Bm90基因； λRed重组系统； Bac-to-Bac系统； 病毒增殖； 病毒组装