联系平台
  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
  • 地址:江苏省镇江市丹徒区长晖路
    666号 江苏科技大学期刊社
  • 邮政编码:212100
  • 电话:0511-85616835
  • 信箱:canyekexue@126.com
  • Q Q:849229965

人肠道病毒71型类病毒颗粒在家蚕BmN细胞及幼虫体内的表达

【期刊年份】2016年第03期
【作者姓名】黄金山 梁飞 柳林 南文斌 程晨 沈兴家 郝碧芳
【作者单位】江苏科技大学;中国农业科学院蚕业研究所

摘要  人肠道病毒71(human enterovirus 71EV71)是近年来暴发危害较严重的手足口病的病原。利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕卵巢培养细胞(BmN)中共表达EV71病毒衣壳蛋白VP1VP2,分析二者组装成病毒样颗粒(VLPs)的效率,比较用不同启动子构建重组病毒的表达效果,并利用家蚕幼虫进行2种蛋白质的共表达及VLPs纯化条件的研究。结果表明,重组病毒vBmBac-vp1-vp2vBmBac-vp1-IRES-vp2均可介导 EV71VP1VP2蛋白在BmN细胞中表达,并能够组装成病毒样颗粒,但采用PphPp10启动子的表达和组装效率明显高于PphIRES启动子组合;将重组病毒vBmBac-vp1-vp21×104 TCID50/头的剂量注射5龄起蚕,Western blotting检测到VP1在幼虫血淋巴中特异性表达,并且随着感染时间的延长表达量增加;经蔗糖梯度密度离心能够有效地纯化蚕体血淋巴中的病毒样颗粒。研究结果为后续EV71疫苗研制奠定了一定的试验基础。

关键词  人肠道病毒71型; 病毒样颗粒; 衣壳蛋白; 家蚕杆状病毒表达系统; BmN细胞; 5龄幼虫