家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef-11基因在病毒感染宿主细胞中的表达特征
摘要 杆状病毒晚期表达因子(late expression factor,LEF)是参与病毒基因组DNA复制和病毒基因转录调控的一个重要家族,该家族成员LEF-11为13 kD的小分子蛋白质。通过比对目前已经测序的63种杆状病毒基因组序列,发现LEF-11的编码基因lef-11在除宿主为双翅目昆虫的CuniNPV外的所有杆状病毒基因组中都存在,暗示lef-11基因可能在包括家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)在内的杆状病毒复制过程中行使重要功能。通过RT-PCR检测和Western blotting分析 lef-11基因及其编码蛋白质在BmNPV侵染的家蚕卵巢培养细胞BmN中的转录与表达时相,其转录本从侵染后6 h开始持续表达,蛋白质从侵染后12 h开始持续表达。当利用DNA聚合酶特异抑制剂阿非迪霉素(aphidicolin)阻断BmNPV病毒基因组DNA复制之后检测LEF-11的表达受到抑制,暗示LEF-11的表达起始于病毒DNA复制之后。以上结果表明:BmNPV lef-11基因在杆状病毒中非常保守,是一个晚期表达基因,可能不直接参与病毒的起始复制,而是参与病毒的大规模复制过程。
关键词 家蚕核型多角体病毒; 晚期表达基因lef-11; DNA复制; 表达时相