家蚕组织蛋白酶L及其特异性抑制剂基因参与微生物诱导蚕体的免疫响应研究
摘要 给家蚕5龄第3天幼虫分别注射藤黄微球菌(革兰阳性菌)和球孢白僵菌(真菌)进行诱导处理,利用已登录的家蚕组织蛋白酶L基因BmCtsL (GenBank登录号:S77508.1)和BmCtsL特异性抑制剂基因BmCtsLI (GenBank登录号:AJ131752)的全长序列设计引物,实时荧光定量PCR检测微生物入侵后家蚕组织中BmCtsL和BmCtsLI基因的时空表达变化及协同反应,分析BmCtsL酶活性变化与家蚕对微生物入侵免疫响应的相关性。家蚕的血细胞与脂肪体是微生物入侵后BmCtsL和BmCtsLI基因出现表达变化的主要组织,其中经藤黄微球菌诱导后,血细胞中的BmCtsL基因响应最快,且基因mRNA转录水平极显著上调,脂肪体中的BmCtsLI基因mRNA转录水平也极显著上调。微生物入侵后蚕体组织中BmCtsL与BmCtsLI基因的表达变化存在时间差异,其中BmCtsL基因先于BmCtsLI基因上调表达,推测BmCtsLI基因通过对微生物入侵的协同反应调控BmCtsL酶活性变化。藤黄微球菌比球孢白僵菌能更快诱导BmCtsL和BmCtsLI基因的表达变化;2种微生物诱导下蚕体血细胞中的BmCtsL酶活性不仅上升快,而且明显高于其他组织。上述结果提示BmCtsL和BmCtsLI可能与家蚕的先天免疫相关,并且佐证了家蚕的血细胞在微生物入侵后能比其他组织更快速地产生免疫响应。
关键词 家蚕; 先天免疫; 微生物诱导; 组织蛋白酶L; 组织蛋白酶L特异性抑制剂; 基因表达