摘要  对家蚕核型多角体病毒（BmNPV）功能未知基因的研究，有利于全面揭示病毒的复制和感染机制。依据NCBI数据库发表的BmNPV T3株基因组序列（GenBank登录号：L33180.1），选择未知功能基因bm64进行生物信息学分析，该基因ORF全长333 bp，编码110个氨基酸，预测蛋白质分子质量为12.71 kD，等电点4.21。将Bm64蛋白亲水区1～49 aa的编码序列与原核表达载体pGEX-4T-3连接，构建重组表达质粒，转化E.coli Rosetta菌株后进行诱导表达。SDS-PAGE检测在预测分子质量处有明显的蛋白质条带，纯化该蛋白质并以此为抗原免疫新西兰大白兔，制备Bm64蛋白多克隆抗体。在病毒感染BmN细胞后24 h即可用Western blot方法检测到Bm64蛋白的表达。通过间接免疫荧光检测到Bm64蛋白在BmNPV感染的BmN细胞中表达，并定位于细胞核。研究结果为进一步分析家蚕核型多角体病毒bm64基因的功能奠定了实验基础。

关键词  家蚕核型多角体病毒； bm64基因； 基因克隆； 原核表达； 亚细胞定位