摘要  MicroRNA(miRNA)在调控病毒与宿主相互作用方面起着重要作用。为了研究家蚕核型多角体病毒（BmNPV）编码的miRNA对其自身靶基因的调控作用，通过高通量测序得到BmNPV编码的一条miRNA——BmNPV-miR-364，利用在线靶基因预测程序 RNAhybrid与RNA22预测BmNPV基因组中有6个基因可能是BmNPV-miR-364的靶基因。分别构建BmNPV-miR-364与6个侯选靶基因3′-UTR的表达载体，共转染BmN细胞后检测其双荧光素酶活性，结果表明BmNPV-miR-364对BmNPV DNA聚合酶（DNA polymerase）基因的抑制作用显著（P<0.05），对其余5个靶基因的抑制作用不显著。进一步采用BmNPV-miR-364 mimic与BmNPV-miR-364-inhibitor分别进行过表达和缺失表达分析，显示BmNPV-miR-364 mimic能显著抑制DNA polymerase基因的表达，而BmNPV-miR-364 inhibitor能显著解除BmNPV-miR-364对DNA polymerase基因的抑制作用。将BmNPV-miR-364与DNA polymerase基因的表达载体共转染BmN细胞，qRT-PCR分析发现实验组细胞中病毒DNA polymerase基因的表达水平显著低于对照组。qRT-PCR检测家蚕经口接种BmNPV后24 h内，血淋巴中BmNPV-miR-364和病毒DNA polymerase基因的表达量很低，但在24 h之后表达量急剧上升。研究结果提示：BmNPV编码的miR-364可以靶向抑制自身复制过程中的重要酶基因，调节DNA的复制。

关键词  家蚕核型多角体病毒； miRNA； BmNPV-miR-364； DNA聚合酶基因； 3′端非翻译区