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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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适合转基因绿色荧光茧丝护色脱胶的酶类及脱胶工艺条件

【期刊年份】2015年第03期
【作者姓名】杨佩 王峰 彭章川 赵萍 夏庆友 席星航
【作者单位】家蚕基因组生物学国家重点实验室,西南大学;重庆航凡蚕丝技术开发有限公司

摘要  转基因绿色荧光茧中的绿色荧光蛋白存在于丝素中,采用传统的皂碱脱胶法极易使茧丝中的绿色荧光蛋白失活。分别用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶对转基因绿色荧光茧丝进行护色脱胶,并通过正交试验优化脱胶工艺条件。观察茧丝经不同酶类脱胶后的绿色荧光强度,筛选出适合转基因绿色荧光茧丝酶法脱胶的酶种类为碱性蛋白酶,其最适脱胶工艺条件为:浴比1∶50,酶用量3 g/L,反应温度50 ℃,反应时间120 minpH 9.0。在此优化工艺条件下用碱性蛋白酶对转基因绿色荧光茧丝进行脱胶的脱胶率可达25.16%,茧丝呈现明显的绿色荧光,而且茧丝表面光滑平整,机械性能损失较小,可以较好地保持茧丝的绿色荧光特性和力学性能。

关键词  转基因蚕丝; 绿色荧光; 脱胶工艺; 碱性蛋白酶