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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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qRT-PCR检测柞蚕中肠热休克蛋白基因ApHSC70对微孢子虫入侵的响应

【期刊年份】2015年第02期
【作者姓名】王勇 刘微 王斌赫 姜义仁 孙影 杨瑞生 秦利
【作者单位】沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁省昆虫资源工程技术研究中心;沈阳农业大学植物保护学院

摘要  为证实柞蚕热休克蛋白在柞蚕防御体系中的作用,利用RT-PCR技术在柞蚕5龄幼虫中肠组织克隆了一个热休克蛋白基因ApHSC70GenBank登录号:KJ437496),并通过实时荧光定量PCRqRT-PCR)检测该基因在感染柞蚕微孢子虫的柞蚕中肠中的表达变化。该基因的开放阅读框(ORF)长1 959 bp,编码652个氨基酸,预测蛋白质分子质量为71.49 kD,等电点(pI)为5.38,具有细胞质特征基序,推测为一种组成型热休克蛋白;ApHSC70与斜纹夜蛾、棉铃虫同源蛋白质的序列相似度最高,分别达96.94%96.33%。感染柞蚕微孢子虫后0~9 h的柞蚕5龄幼虫中肠组织中,ApHSC70基因转录水平变化不大,但感染后12 h该基因的转录水平开始升高,至感染后21 h达到最高值。研究结果表明,柞蚕中肠组织的ApHSC70基因在柞蚕微孢子虫入侵时的表达变化呈现出一定的应激响应,表达量最高可上调近5倍,推测该基因可能参与了柞蚕的免疫防御过程。

关键词  柞蚕; 热休克蛋白70 免疫防御; 柞蚕微孢子虫; 实时荧光定量PCR