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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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家蚕蜕皮激素受体基因EcR-A的启动子活性区域分析

【期刊年份】2014年第06期
【作者姓名】杜杰 黄明霞 刘云垒 赵国栋 卫正国 沈卫德
【作者单位】苏州大学基础医学与生物科学学院;现代丝绸国家工程实验室

摘要  昆虫蜕皮激素(20-羟基蜕皮酮)与蜕皮激素受体(EcR)和超气门蛋白(USP)相互作用启动蜕皮级联反应过程,由EcR USP组成的复合物是蜕皮激素的作用靶标。为研究家蚕EcR-A基因(BmEcR-A)的转录调控机制,利用双荧光素酶报告系统和Bac-to-Bac表达系统制备含5′端长度不同BmEcR-A基因启动子片段的重组杆状病毒,分别将重组杆状病毒感染家蚕后检测启动子的活性。结果表明,在BmEcR-A启动子的-637-518 bp-278-177 bp区域存在正调控元件,并且能被0.002 g/L 20E诱导。通过构建含5′端长度不同BmEcR-A启动子片段的荧光素酶报告质粒,在细胞水平上进一步分析BmEcR-A启动子活性区域,结果显示:在-637-612 bp-278-177 bp区域包含BmEcR-A基因启动子转录调控必需的重要调控元件;当删除-197-177 bp区域后,启动子活性明显增强,推测在该区域可能含有一个转录抑制因子结合位点。研究结果提示:上述启动子区域包含有转录调控元件的结合位点,是进一步研究BmEcR-A启动子核心区域的重要线索。

关键词  家蚕; 蜕皮激素受体; EcR-A基因; 启动子活性; 双荧光素酶报告系统; Bac-to-Bac表达系统