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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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家蚕卵黄原蛋白(BmVg)基因启动子的克隆与活性鉴定

【期刊年份】2014年第03期
【作者姓名】杨从文 沈关望 张海燕 彭芷昕 陈恩祥 邢润苗 刘红玲 韩超珊 林英
【作者单位】家蚕基因组生物学国家重点实验室,西南大学

摘要  卵黄原蛋白(vitellogeninVg)在家蚕蛹期脂肪体高量表达,研究家蚕卵黄原蛋白基因(BmVg)的转录调控机制及启动子活性,将有助于利用家蚕蛹生物反应器高效表达外源蛋白。设计特异引物,以家蚕蛹基因组DNA为模板PCR扩增得到BmVg长约1.5 kb的启动子片段。构建由不同长度截短BmVg启动子片段驱动荧光素酶报告基因表达的细胞转染载体pGL3-Vg Promoter,分析转染家蚕胚胎培养细胞BmE-SWU1中的BmVg启动子片段活性,结果显示最低截短至BmVg基因翻译起始位点上游90 bp的启动子片段具有转录活性。进一步用截短法分析不同长度启动子的活性,当启动子-752-952 bp-42-152 bp区域被截掉后,启动子的转录活性明显降低,暗示这2个区域内可能存在与启动子启动效率相关的重要调控元件。

关键词  卵黄原蛋白基因; 启动子; 克隆; 活性区域; 家蚕蛹