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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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基于RNA-Seq技术分析家蚕卵巢培养细胞(BmN)高表达基因

【期刊年份】2014年第03期
【作者姓名】何蕾 薛仁宇 曹广力 胡小龙 贡成良
【作者单位】苏州大学基础医学与生物科学学院;苏州大学现代丝绸国家工程实验室

摘要  为了更全面了解家蚕卵巢培养细胞(BmN)的转录基因及其涉及的功能,对BmN细胞进行深度RNA测序(RNA-seq)。得到的总读段(reads)数为80 968 776条,有效RNA-Seq 数据68 672 812条,reads的平均长度为94.85 bp,有效数据达到84.81%,证实测序数据可信。将有效数据比对家蚕mRNA序列,发现BmN细胞中的10 182个基因有不同程度表达。利用qRT-PCR测定随机选择BmN细胞中7个基因的相对表达水平,与RNA-Seq的结果略有差异,但总体趋势表现一致。以家蚕Actin基因作为参照,计算BmN细胞中表达基因读段倍率变化的 log2(Fold_change),将 log2(Fold_change)2的基因定义为高表达基因,共有41 个基因在BmN细胞中高表达。选取FPKM>15且表达水平最高的100个基因进行 GO注释,主要涉及细胞组分、分子功能和生物学进程,富集在细胞组分中的基因比率高于富集在分子功能、生物学进程中的基因比率。KEGG分析显示这100 个高表达基因分布在能量代谢,转录,翻译,折叠、组装和降解以及信号转导等22条通路上。比较发现BmN细胞与家蚕卵巢组织之间的高表达基因存在差异。

关键词  家蚕; BmN细胞; 基因表达; GO注释; KEGG 分析