家蚕化学感受蛋白CSP9在幼虫和蛹期的表达特点
摘要 昆虫化学感受蛋白(CSPs)是一类小分子质量的水溶性蛋白质,广泛分布于昆虫的各种化学感受器中,具有多种生理功能。以家蚕为模式,研究csp9基因与CSP9蛋白在家蚕不同发育阶段以及5龄幼虫不同部位和器官的表达特征,为进一步阐明家蚕乃至昆虫CSPs的功能和作用机制提供有益信息。qRT-PCR检测csp9基因在家蚕5龄幼虫头部、胸部、腹部和尾部的表达水平较高,而体内组织中仅在卵巢有少量表达;CSP9蛋白的免疫荧光定位分析显示CSP9蛋白广泛分布于各龄幼虫头部、腹部、尾部的体表感受器。利用qRT-PCR和Western杂交检测分析csp9基因以及CSPs蛋白在家蚕幼虫和蛹的不同发育时期的表达均呈现明显的规律性变化:在幼虫各龄眠蚕的表达水平较低,至眠起出现升高,取食12 h后下降;5龄末吐丝前的表达水平又急剧上升,直到化蛹后2 d再次下降,蛹末期(羽化前)又有所上升。由此推测CSP9蛋白不仅与幼虫体表感受器的功能有关,而且可能在家蚕不同时期发育变态过程中发挥重要作用。
关键词 家蚕; 化学感受蛋白; 表达特征; 荧光定量PCR; 免疫印迹法