摘要  对氧磷酶1(paraoxonase 1，PON1)是生物体内存在的一种广谱的非专一性酯酶，在水解有机磷杀虫剂及降解神经毒剂中发挥重要作用。利用已构建的含人血清pon1基因的原核表达载体pET-28a-pon1，在E. coli中诱导表达人血清PON1，通过Ni-NTA亲和层析纯化后制备兔多克隆抗体；利用Bac-to-Bac系统构建重组杆状病毒vBm-pon1，并感染家蚕5龄幼虫，经SDS-PAGE 和Western blotting检测鉴定人血清PON1在蚕体内成功表达，并获得了纯度较高的重组人血清PON1。以对氧磷为底物，对2个表达系统获得的重组人血清PON1的酶活性进行检测，结果表明在家蚕幼虫体内表达并纯化的重组人血清PON1的酶活性要明显高于在E. coli中表达的人血清PON1蛋白。推测家蚕杆状病毒表达系统比原核表达系统多了糖基化、磷酸化等蛋白质修饰功能。进一步试验验证家蚕幼虫表达的重组人血清PON1去糖基化后其酶活性丧失，表明糖基修饰对于维持PON1的生物学功能至关重要。 

关键词  家蚕杆状病毒表达系统； 人血清对氧磷酶1； 酶活性； 糖基化