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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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桑树转录因子CBF1基因的克隆及序列特征与低温应激表达

【期刊年份】2013年第06期
【作者姓名】张林 刘晓格 方荣俊 潘刚 刘利 赵卫国 王琳
【作者单位】江苏科技大学;中国农业科学院蚕业研究所

    CBF(C-repeat binding factor)是一类与植物抗逆应答相关的转录因子。利用RT-PCRRACE技术克隆桑树CBF1基因的cDNA序列,命名为MCBF1(GenBank登录号:JX186750)。该基因序列全长1 134 bp,包括693 bp的开放阅读框,87 bp5′端非翻译区和354 bp3′端非翻译区;预测其编码的氨基酸序列具有保守的AP2结构域,且该结构域的两端拥有CBF家族特有的短多肽序列PKK/RPAGRxKFxETRHPDSAWR,与其它植物CBF1的序列相似性较高;基于CBF1序列构建的系统进化树显示桑树与柑橘(Citrus jambhiri)、垂枝桦(Betula pendula)和切花月季(Rosa hybrid cultivar)的亲缘关系较近。将构建的pET28a-MCBF1原核表达载体转化大肠杆菌BL21后,诱导表达的MCBF1重组蛋白分子质量大小与预测一致。半定量RT-PCR分析MCBF1基因在未经过低温处理的对照桑苗幼叶中无表达,而在低温处理后的桑苗幼叶中有表达,其中低温处理4 d后的表达量最高。克隆的MCBF1基因编码蛋白质具有典型的CBF家族结构域,并具有低温诱导表达的特点,推测其在桑树对低温的耐受性中发挥作用。

关键词  桑树; 转录因子MCBF1 基因克隆; 序列特征; 原核表达; 应激表达