桑树MuPR1a基因的克隆及启动子活性分析
摘要 病程相关蛋白(PR)在植物对病原物的防卫反应过程中具有重要作用。从桑树叶片中克隆得到桑树病程相关蛋白基因MuPR1a(GenBank登录号: KC453993)。该基因编码区全长为516 bp,共编码171个氨基酸,编码蛋白质具有一个典型的分泌型信号肽序列和多个PRs蛋白保守结构域,其氨基酸序列与其它植物的PR1a蛋白具有很高的同源性。利用巢式PCR(Tail-PCR)技术克隆得到MuPR1a的启动子,并将其命名为MPRp(GenBank 登录号:KC849423),该启动子序列含有CAAT-box、TATA-box、TCA-element、GCC box等正常转录起始必需的顺式作用元件。农杆菌介导的烟草叶片瞬时表达分析显示,MPRp具有启动子的功能,能够驱动下游报告基因的表达并且具有一定的被病原菌诱导表达的活性。
关键词 桑树;MuPR1a基因;启动子;克隆;巢式PCR;瞬时表达