杨树木质部特异启动子5′端侧翼序列缺失表达载体构建及转化烟草的研究
摘要 采用5′端系列缺失分析法,PCR扩增杨树木质部特异性启动子JCesAP中与转录起始位点距离不同的5′端缺失启动子片段ZU2、ZU3、ZU4。为鉴定缺失片段的功能活性,以β-葡糖醛酸酶基因(GUS)作为报告基因,分别构建JCesAP启动子3个缺失片段的表达载体,并通过农杆菌介导瞬时转化烟草。对转化烟草植株进行GUS活性检测的结果表明,缺失片段ZU3、ZU4有启动子活性,且ZU4启动子活性强度与CaMV35S启动子相当,转化烟草的叶片表面都呈现大面积蓝色,而ZU2没有启动子活性。木质部特异性核心启动子的筛选将有助于利用转基因技术治理桑天牛等天牛类蛀干害虫。
关键词 杨树;木质部特异启动子;缺失分析法;载体构建;瞬时表达