家蚕mdm2基因的克隆及对p53基因表达水平的调控分析
摘要 MDM2(murine double minute)是肿瘤抑制因子P53最重要的负性调控因子。为了解家蚕是否存在mdm2基因,利用人和小鼠的mdm2基因作为电子探针在家蚕EST数据库中检索到了同源序列。根据该序列设计引物,在家蚕蛹cDNA中扩增出开放阅读框长度为885 bp的mdm2同源基因,命名为m-mdm2(GenBank登录号:KF201646)。序列结构分析表明该基因编码的蛋白质序列具有MDM2保守域;同源性分析显示Bm-mdm2与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)、大斑黑蝶(Danaus plexippus)mdm2的亲缘关系较近。为探讨Bm-mdm2与Bmp53的互作关系,利用家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染及H2O2刺激BmN细胞后,分析2个基因的表达变化。结果显示Bm-mdm2表达量下调,而Bmp53的表达量上调,并且Bmp53与Bm-mdm2的表达量变化存在相反的趋势,推测二者之间可能存在负调控关系。
关键词 家蚕;mdm2基因;克隆;诱导表达;p53基因