感染家蚕微孢子虫的蚕体血淋巴蛋白质差异表达分析及质谱鉴定
摘要 昆虫具有高效的先天性免疫系统,血淋巴在免疫过程中发挥重要作用。收集感染家蚕微孢子虫(Nb)后第2、4、6、8天的家蚕幼虫血淋巴,分别以相同发育时期健康家蚕幼虫的血淋巴为对照,进行蛋白质SDS-PAGE电泳分析,寻找家蚕免疫应答Nb侵染的相关蛋白质。结果显示,从感染Nb第6天起,幼虫血淋巴蛋白质组成发生改变,感染第8天的血淋巴样品中出现了3条明显下调的差异蛋白条带。利用线性离子阱质谱技术(Linear Ion Trap Quadrupole,LTQ)鉴定差异蛋白条带,主要有肌动蛋白3(Actin3)、载脂蛋白(apolipophorin protein)、性别特异储存蛋白2(sex-specific storage-protein 2 precursor)、储藏蛋白(storage protein)、酚氧化物酶亚基(phenoloxidase subunit)、转铁蛋白(transferrin)和热激相关蛋白70(heat shock cognate protein 70),这7种蛋白质分别在家蚕的能量代谢、先天性免疫以及蛋白质合成、运输、修复等方面扮演重要角色。家蚕感染Nb后血淋巴中的上述7种蛋白质的表达变化,推测可能会影响蚕体自身对Nb的免疫防卫反应能力。
关键词 家蚕;血淋巴;家蚕微孢子虫;差异表达蛋白;线性离子阱质谱;免疫