摘要 采用不同方法获得家蚕微孢子虫孢壳，并提取孢壳蛋白进行双向电泳分析，确定适用于蛋白质组学研究的家蚕微孢子虫孢壳蛋白提取方法。通过密度梯度离心纯化家蚕微孢子虫孢子后，分别用发芽法和玻璃珠破碎法得到孢壳，再经密度梯度离心纯化孢壳。显微镜观察可见用发芽法得到的孢壳明显膨大趋于圆形，而用玻璃珠破碎法得到的孢壳形状变化不大，但有明显的缺口。使用蛋白质裂解液提取2种方法获取孢壳的蛋白质并进行双向电泳，在发芽法提取孢壳蛋白的双向电泳图谱中检测到205个蛋白点，在破碎法提取孢壳蛋白的双向电泳图谱中检测到413个蛋白点。采用发芽法提取过程中由于使用了碱性溶液，使孢壳表面的碱溶性蛋白脱落，导致提取的孢壳蛋白丰度降低；而玻璃珠破碎法避免了碱溶过程，提取的孢壳蛋白丰度较高，并且操作简单，有利于完整获取孢壳碱溶性蛋白和与内壁结合的蛋白。

关键词 家蚕微孢子虫；孢壳蛋白；蛋白质组；发芽法；玻璃珠破碎法；双向电泳；