干涉BmNPV极早期非必需基因ie-2的转基因家蚕系统构建和抗性检测
【期刊年份】2013年第04期
【作者姓名】蒋亮 彭正文 党颖慧 赵萍 肖阳 邢东旭 夏庆友
【作者单位】家蚕基因组生物学国家重点实验室,西南大学;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所
摘要 家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是严重危害家蚕的病原之一。为了探究通过转基因干涉BmNPV非必需基因抑制病毒的增殖,提高家蚕抗性的可行性,选择BmNPV极早期非必需基因ie-2作为靶标,构建转基因干涉载体,通过显微注射获得转基因家蚕系统A4Pie2H-A和A4Pie2H-B。3龄幼虫添食感染BmNPV后,A4Pie2H-A与A4Pie2H-B的幼虫死亡率分别比非转基因对照品种降低19%和24%;定量PCR结果显示A4Pie2H-A与A4Pie2H-B的幼虫体内的ie-2 mRNA表达量分别为非转基因对照品种的50%和20%,病毒DNA含量分别为非转基因对照品种的32%和12%。此外,2个转基因家蚕系统的全茧量和茧层率与正常家蚕品种比较无显著差异。研究结果表明,干涉BmNPV极早期非必需基因ie-2可以显著抑制转基因家蚕体内病毒的复制增殖,使幼虫死亡率降低。
关键词 家蚕核型多角体病毒; 非必需基因; ie-2; 转基因干涉; 家蚕; 抗性; 经济性状