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- 国内刊号：CN 32-1115/S
- 国际刊号：ISSN 0257-4799
- 主管部门：中国科学技术协会
- 主办单位：中国蚕学会
中国农业科学院蚕业研究所 - 主编：李木旺
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用AKTA explorer 10蛋白纯化系统分离纯化家蚕类免疫球蛋白
【期刊年份】2013年第04期
【作者姓名】杜瑶瑶 刘玲玲 王鉴 舒建洪 张耀洲
【作者单位】浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所；天津市国际生物医药联合研究院
【作者姓名】杜瑶瑶 刘玲玲 王鉴 舒建洪 张耀洲
【作者单位】浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所；天津市国际生物医药联合研究院
摘要 类免疫球蛋白(Hemolin)是昆虫的先天性免疫蛋白。为了获取纯度高、具有天然活性的家蚕Hemolin，将被家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染的家蚕蛹进行匀浆处理，离心后对上清液进行DEAE弱阴离子交换层析，进而利用Superdex 200凝胶过滤层析获得家蚕Hemolin的初级纯化产物，经质谱鉴定验证后再利用Superdex 75凝胶过滤层析对初级产物做进一步分离纯化。获得的纯化产物采用SDS-PAGE和Western blot检测到单一的大小约45 kD的蛋白质条带。采用该层析技术与条件能有效制备出纯度较高的具有天然活性的家蚕Hemolin。
关键词 家蚕蛹； 类免疫球蛋白； 家蚕核型多角体病毒； 弱阴离子交换层析； 凝胶过滤层析