摘要 在家蚕耐氟近等基因系SSH文库中发现一条差异表达的EST序列。以家蚕耐氟近等基因系群体的幼虫中肠cDNA为模板，利用RACE技术克隆了该基因的全长cDNA序列，将该基因命名为Asp(GenBank登录号：JX312360)。该基因cDNA全长868 bp，包括20 bp的5′-UTR和77 bp的3′-UTR，ORF为771 bp，编码256个氨基酸。该基因由4个外显子和3个内含子组成，编码蛋白质为亲水性蛋白，属于丝氨酸蛋白酶家族，在第17～18氨基酸残基处存在信号肽切割位点。荧光定量PCR检测该基因在家蚕耐氟近等基因系群体幼虫的中肠、脂肪体及马氏管中都有表达，以中肠的表达量最高，表达量因个体的耐氟性而存在差异：中肠中，敏感个体的表达量是耐氟个体的2.49倍；脂肪体中，敏感个体与耐氟个体之间的表达量差异不显著；马氏管中，敏感个体的表达量是耐氟个体的8.16倍。该基因在不同耐氟性家蚕品种5龄幼虫中肠的表达量存在极显著差异，在耐氟性品种的表达量是氟敏感品种的50倍。研究结果提示，该碱性丝氨酸蛋白酶基因可能与家蚕的耐氟性有一定的关联。

关键词 家蚕；耐氟近等基因系；碱性丝氨酸蛋白酶；基因克隆；序列特征；组织表达；荧光定量PCR