摘要  规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated systems,CRISPR/Cas)系统具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点,近年来在基因编辑领域得到广泛应用。采用显微注射技术,将LbCas12a转基因载体注入家蚕品系N4的胚胎中,通过绿色荧光筛选标记筛选出阳性转基因家蚕。随后,提取转基因蚕蛾的基因组DNA、总RNA及总蛋白,基因组PCR检测确定LbCas12a基因成功插入转基因家蚕的基因组中,且定位于转基因家蚕13号染色体上。通过定量PCR检测及Western blot分析，确定LbCas12a基因在转基因家蚕中成功表达。对转基因家蚕进行经济性状评价,证实LbCas12a转基因家蚕的蚕茧及蚕蛹与正常N4品系家蚕无显著差异。综上所述,LbCas12a转基因家蚕的构建为CRISPR/Cas12a基因编辑技术在家蚕中的应用奠定了基础。