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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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家蚕追寄蝇虾红素样精液蛋白酶EsSemp的基因克隆与特性分析

【期刊年份】2024年第03期
【作者姓名】王耒耒1  王闪闪1  浦月霞2  刘吉银1  王梅仙1,3  朱娟1,3  沈兴家1,3  沈中元1,3  唐顺明1,3
【作者单位】1江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑与畜禽生物技术重点实验室;2广西壮族自治区蚕业技术推广站;3农业农村部蚕桑遗传改良重点实验室,中国农业科学院桑蚕科学研究中心

摘要  虾红素样金属蛋白酶广泛存在于各种昆虫中,参与受精繁殖、孵化及消化等生理功能。为鉴定家蚕追寄蝇生殖繁育相关基因,利用RACE技术克隆获得家蚕追寄蝇虾红素样精液蛋白酶基因全长cDNA序列,命名为EsSemp(GenBank登录号: OP777491),其全长为985 bp,ORF为 771 bp,编码256个氨基酸残基。以染色体步移技术克隆获得EsSemp完整基因结构,由1个内含子和2个外显子组成。系统发生树结果显示,EsSemp与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)精液蛋白酶基因副本的产物CG15254高度同源。qRT-PCR结果显示,EsSemp在雄蝇副性腺表达较弱,在蝇蛆和成蝇的中肠和马氏管表达较强,在卵期0 h和卵后期大量表达,推测EsSemp参与了受精、孵化与消化代谢等过程。体外表达EsSemp蛋白,结果显示EDTA可抑制EsSemp酶活。以上研究结果为进一步阐明家蚕追寄蝇繁殖发育相关分子机制提供了参考,为开发家蚕蝇蛆病防治新途径提供了基础信息。

关键词  家蚕追寄蝇; 虾红素样蛋白酶基因; RACE; 繁殖发育; 蛋白质表达