摘要  为探索桑叶原生质体制备和精确计数的方法，以桑树新一之多倍体系列的组培自生根苗为材料，通过优化酶解液配方，利用流式细胞仪进行叶片原生质体计数试验。结果表明，酶解液为5%纤维素酶-R10+5%果胶酶+20 mmol/L KCl+20 mmol/L MES+0.4 mol/L 甘露醇+10 mmol/L CaCl₂+5 mmol/L β-巯基乙醇+0.1% BSA（pH 5.7）时，取28.26 mm²叶片组织，在5 mL酶解液中黑暗静置3 h，耗时较短，酶解较为充分。将酶解液稀释100倍后过滤上机，可以准确高效地检测细胞数；使用移液器量取剩余滤液体积，可以准确计算出上机吸取的滤液体积；由此，可以较为准确快速地分析制备滤液中的原生质体数目。研究结果优化了解离桑树多倍体得到原生质体的条件，为快速检测原生质体数目提供了技术支持。