桑树皱叶病毒vⅡ变种侵染性克隆的构建及其致病性鉴定
摘要 桑树皱叶病毒vⅡ变种是对桑树皱叶病毒(mulberry crinkle leaf virus,MCLV)进行遗传进化分析发现的,其对桑树的致病性尚不清楚。利用PCR和同源重组的方法构建了农杆菌介导的含有2倍大基因间隔区(large intergenic region, LIR)的MCLV vⅡ侵染性克隆,分别接种到其天然宿主桑树和实验植物番茄植株上,以期明确MCLV vⅡ变种对桑树的致病性及对实验植物的侵染性和致病性。结果显示,桑树和番茄分别在接种45 d和25 d检测到全部侵染成功的植株,说明构建的含有2倍LIR的MCLV vⅡ侵染性克隆具有侵染性;MCLV vⅡ的侵染性克隆可以侵染番茄,且草本植物番茄接种成功率和接种响应速度都要高于和快于木本植物桑树,说明番茄可以作为MCLV研究的实验宿主;接种后检测为阳性的桑树在90 d的观察期内,其叶部没有表现出病毒感染样症状,接种后检测为阳性的番茄在45 d的观察期内未表现出任何病毒感染样症状。这些发现为双生病毒侵染性克隆的构建提供了一种新的思路,并为进一步研究MCLV与寄主互作和MCLV的应用奠定基础。