摘要  针对柞蚕微孢子虫分子检测受限于繁琐的DNA提取而局限于实验室使用的瓶颈问题，以成本较低的碱裂解法结合磁珠抽提，建立了一种全程在96孔板上使用排枪操作的高通量DNA提取方法（HT提取），对比HT-冻融法和HT-SDS法2种裂解方法获得的DNA在常规PCR与荧光定量PCR（qPCR）中的检测下限，并进行微粒子病筛查的应用。结果表明，HT提取法与传统方法相比，无繁琐预处理，操作快速、通量高，污染低、抗干扰、提取DNA品质好，主要耗材能重复使用，可自动化，人力物力成本较低；HT-SDS法具有更稳定的裂解效果，获得的DNA用于常规PCR、qPCR检测下限可达4.5和0.045个/μL；HT-冻融法在常规PCR与qPCR中的检测下限为45和0.45个/μL，而传统抽提方法的常规PCR检测下限仅为110个/μL。结合HT-SDS法和qPCR，对3 000个样品进行微粒子病筛查，结果显示，其检测灵敏度显著高于现行镜检技术，最高高出近11倍，且对低带毒品种优势尤为显著，有望实现在柞蚕种茧微粒子病检疫及柞蚕种质资源保护中的应用，促进柞蚕业发展。