桑树叶酰聚谷氨酸合成酶基因的克隆及表达分析
摘要 对桑树叶酰聚谷氨酸合成酶(folylpolyglutamate synthetase,FPGS)基因进行克隆,获得2个桑树FPGS基因(分别命名为MaFPGS1和MaFPGS2),其编码区分别编码543、558个氨基酸,推导蛋白质分子质量分别为60.3和61.8 kD,pI值分别为5.73和6.02。MaFPGS1与MaFPGS2的氨基酸序列相似度约为49.80%,MaFPGS1与川桑同源蛋白FPGS(XP_010108389.1)的序列相似度为97.60%,MaFPGS2与川桑同源蛋白FPGSiX4(XP_024025432.1)的序列相似度为91.79%。MaFPGS1和MaFPGS2各自聚在1个分支,二者与枣(Ziziphus jujuba)的FPGS亲缘关系都最近。MaFPGS1和MaFPGS2在桑树嫩叶中的表达量最高,根中表达量最低。在桑树种子萌发过程中,MaFPGS1的表达量比MaFPGS2更高,且在吸水后10 d子叶完全展开时达到最高。在桑树离体再生根系中,MaFPGS2的表达量比MaFPGS1更高,且在诱导7 d后表达就明显上调,而MaFPGS1的表达在诱导15 d后才显著上调,推测MaFPGS可能参与根系形成。桑树再生植株受到轻度低氮胁迫时,MaFPGS的表达量显著增加。研究结果为进一步解析MaFPGS基因的功能奠定了基础。