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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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家蚕G4结合蛋白BmLARK的重组表达和结晶

【期刊年份】2021年第03期
【作者姓名】叶若琦1  牛康康1  韩书婧2  汪颖2  李琼2  周丛照2  冯启理1
【作者单位】1广东省昆虫发育生物学与应用技术重点实验室,广州市昆虫发育与应用重点实验室,华南师范大学生命科学学院昆虫科学与技术研究所;2中国科学技术大学生命科学学院结构生物化学实验室

摘要  细胞内DNA通常以B型右手双螺旋结构的形式存在。但当一段DNA富含连续出现的鸟嘌呤(G)时,这段DNA序列有可能折叠为四链体(G-quadruplex,G4)结构。G4结构广泛分布于生物的基因组中,参与基因的转录调控、DNA复制、端粒保护和蛋白质翻译等重要的生物学过程。我们前期在家蚕转录因子BmPOUM2基因的启动子区鉴定到一个G4结构,并筛选到一个与该结构特异结合的蛋白BmLARK。在本研究中,为了分析BmLARK与G4结构结合的分子机制,我们首先对编码BmLARK全长及其多个截短的DNA序列进行了分子克隆,利用原核表达系统对BmLARK和截短蛋白进行了重组表达和纯化,获得的重组蛋白在体外可与BmPOUM2-G4结构结合;然后运用悬滴蒸汽扩散法对该蛋白质-DNA结合复合物进行结晶,初步获得了晶体。试验结果为进一步探索获得和解析BmLARK-G4复合物的晶体结构提供了线索。

关键词  家蚕; G-四链体; 转录因子; BmLARK; 晶体