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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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家蚕追寄蝇孵化酶的基因克隆与特性分析

【期刊年份】2022年第05期
【作者姓名】王闪闪1  浦月霞2  Zufan Bekele Kassa1  王耒耒1  徐娇1  刘吉银1  王梅仙1,3  朱娟1,3  沈兴家1,3  沈中元1,3  唐顺明1,3
【作者单位】1江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室;2广西壮族自治区蚕业技术推广站;3中国农业科学院蚕业研究所,农业农村部蚕桑与遗传改良重点实验室

摘要  家蚕追寄蝇寄生于家蚕幼虫引起的蝇蛆病危害蚕业生产。为从分子水平研究家蚕追寄蝇的孵化机制,以发育1.5 d的蝇卵为材料,结合RACE技术获得家蚕追寄蝇孵化酶基因的全长cDNA,命名为EsHE(GenBank登录号:ON042475)。EsHE基因cDNA全长1 507 bp,包含159 bp 5′ UTR、412 bp 3′ UTR和936 bp的完整ORF,编码311个氨基酸;EsHE蛋白序列含有孵化酶特征序列HELMHVLGFMHE(锌结合基序)和YDYGSVMHY(Met-转角基序);系统进化树分析显示,家蚕追寄蝇与丝光绿蝇的孵化酶亲缘关系最近。qRT-PCR检测EsHE基因在家蚕追寄蝇卵期的表达模式,发现在卵产后36 h EsHE表达量开始大幅上升,至孵化前的48 h达到最高水平;且在3龄幼虫中肠组织高水平表达。这些结果暗示EsHE与家蚕追寄蝇的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。通过以家蚕追寄蝇基因组DNA为模板扩增发现,EsHE基因含有1个内含子(2 638 bp)和2个外显子(第1外显子1 005 bp,第2外显子502 bp),基因结构与铜绿蝇、丝光绿蝇HE相似。上述研究结果为进一步阐明家蚕追寄蝇孵化分子机理奠定了基础,为以孵化相关基因作为靶点的杀虫剂研究开发提供了理论基础。

关键词  家蚕追寄蝇; 孵化酶; 基因克隆; qRT-PCR; 基因结构