摘要  MicroRNA（miRNA）在生物生理生化进程、信号传导、细胞调亡、响应生物和非生物胁迫等方面发挥重要功能，本试验克隆桑树miR166f及其前体序列，分析其时空表达特性，并构建用于瞬时表达的miR166f双元超表达载体，为桑树miR166f抗旱功能机制的进一步探究奠定基础。克隆获得了桑树miR166f及其前体序列，pre-miR166f长91 nt，miR166f长21 nt，miR166f在前体的3′臂上，pre-miR166f最小折叠自由能（MEF）为-217.14 kJ/mol，具有典型的植物miRNA前体二级结构特征；miR166f的5′端上游除了包含典型的具有转录起始功能的TATA-box和CAAT-box外，还含有多个胁迫响应顺式作用元件和一些激素响应元件；qRT-PCR分析表明miR166f在桑树不同组织中的相对表达量有较大差异，其中在茎中表达量最高，在木质部中表达量最低；miR166f在高盐和干旱胁迫处理条件下均上调表达，表明该基因参与了桑树的抗逆响应过程；成功构建了用于瞬时转化表达的miR166f的双元超表达载体pCAMBIA-35S-GUS-miR166f，为桑树miR166f抗逆功能机制的进一步探究奠定基础。