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家蚕多梳蛋白家族基因BmPsc的全长序列克隆及表达分析
【期刊年份】2013年第01期
【作者姓名】徐曼 谈娟 张奎 王雪 崔红娟
【作者单位】家蚕基因组生物学国家重点实验室，西南大学
【作者姓名】徐曼 谈娟 张奎 王雪 崔红娟
【作者单位】家蚕基因组生物学国家重点实验室，西南大学
摘要 多梳蛋白(polycomb group，PcG)基因Bmi-1(B cell-specific MLV integration site-1)与人类造血干细胞以及多种肿瘤干细胞的维护相关，Bmi-1蛋白具有典型的N端Ring结构，通过结合核小体并抑制其重塑以实现抑制关键基因转录，具有沉默目的基因的功能。Bmi-1在昆虫中的同源基因为Psc(posterior sex combs)。采用RACE技术获得家蚕Psc基因(BmPsc)全长4 084 bp的序列。该基因位于家蚕第4号染色体上，是一个单外显子基因，ORF为3 291 bp，编码
1 096个氨基酸，蛋白质分子质量121 kD，等电点（pI）为9.83；同源序列比对发现BmPsc与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)的Psc基因序列有58%的相似度，与果蝇(Drosophila melanogaster)的Psc基因序列仅有34%的相似度；氨基酸序列分析显示BmPsc具有保守的N端Ring结构。利用qRT-PCR检测家蚕5龄第3天幼虫各组织以及5龄各时期幼虫血液中BmPsc基因的表达水平，发现BmPsc在各组织均有表达，在精巢以及卵巢中的表达明显较高，其次是翅原基(含造血器官)，在循环血液中也有较高表达；在5龄各时期幼虫血液中的表达呈一定规律性，于蜕皮后的5龄第2天以及进入变态前的5龄第6天出现表达峰值，而在5龄中期(第4～5天)为表达低谷。研究结果为进一步阐释该基因在细胞水平以及个体水平对干细胞分化的抑制作用奠定了基础。