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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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不同来源桑黄粗多糖诱导肝癌细胞HepG2 S期阻滞及凋亡的研究

【期刊年份】2020年第01期
【作者姓名】朱俭勋1  钟石1  孙海燕2  孙雨晴1  霍进喜1  陈伟国2  吕志强1  计东风1  李有贵1
【作者单位】1浙江省农业科学院蚕桑研究所;2海宁市经济作物技术服务站

摘要  通过MTT、流式细胞计数、qRT-PCR等方法,研究不同来源桑黄粗多糖对肝癌细胞HepG2的抑制作用,并探讨其作用机制。结果发现,来源于不同地区、不同寄主桑黄子实体粗多糖对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用差异显著,其中采自四川攀枝花紫油树(SH8)、福建未知树种(SH12)上的桑黄子实体粗多糖对HepG2有一定的促增殖作用;但大多数桑黄子实体粗多糖对HepG2有抑制作用,且随多糖浓度的增加抑制作用增强。采自新疆阿克苏桑树(SH1)桑黄子实体粗多糖(800 μg/mL)对HepG2细胞的增殖抑制率高达50.53%,并影响HepG2细胞周期各时相的分布,G0/G1期细胞比率从58.54%±2.61%降低至34.95%±4.50%,S期细胞比率从27.27%±1.73%升高至62.16%±3.12%,G2/M期细胞比率从14.19%±0.88%降低至2.89%±1.97%;凋亡结果显示,SH1粗多糖(800 μg/mL)作用48 h后,早期凋亡细胞比率从正常组0.26%±0.09%提高至8.81%±0.48%,晚期凋亡细胞比率从正常组0.26%±0.11%提高至51.75%±2.82%,坏死细胞比率由正常组0.89%±0.07%提高至17.01%±1.29%;qRT-PCR结果显示,SH1粗多糖处理后细胞内周期调控相关蛋白P21、P27、P57、Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E、CDK1、CDK3和CDK4在mRNA水平表达显著上调,CDK2表达显著下调;凋亡相关基因Bcl-XSBadBaxBidBcl-2的表达水平也显著升高。结果表明,桑黄粗多糖通过调控激活Cyclin A-CDK3、Cyclin E-CDK3、CyclinD-CDK4复合物促进HepG2细胞由G1期进入S期,抑制Cyclins-CDK2复合物诱导HepG2细胞S期阻滞,同时上调促凋亡蛋白基因Bcl-XSBadBaxBid的表达,诱导细胞凋亡。

关键词  桑黄; 多糖; 肝癌细胞HepG2; 细胞周期; 凋亡