摘要  RNA诱导的基因沉默复合体(RNA-induced silencing complex，RISC)核心蛋白为Argonaute(AGO)家族蛋白，作为miRNA及RNAi功能途径中的关键蛋白，能够结合miRNA和siRNA，降解靶标基因mRNA或抑制其翻译。因此，利用AGO蛋白抗体通过免疫沉淀分离其结合RNA是目前规模化分离鉴定miRNA及相关小RNA靶基因的重要方法。首先对家蚕AGO1基因进行克隆表达和抗体制备，用自制的兔多克隆抗体免疫沉淀家蚕组织内源BmAGO1蛋白，成功分离BmAGO1蛋白结合的RNA；同时在BmN细胞中采用6×His标签融合表达BmAGO1蛋白，用His单抗免疫沉淀His-BmAGO1蛋白，同样成功分离获得其结合RNA。qRT-PCR检测发现，BmAGO1蛋白结合的RNA中含有家蚕miRNA靶基因BmEm4的mRNA。研究结果为批量鉴定家蚕miRNA靶基因奠定了基础，同时也为深入研究BmAGO1蛋白在家蚕中的功能提供了依据。